肺炎支原体快速检测方法的建立及应用评价

作者：张杰; 胡军; 刘杨; 李元

来源：国际检验医学杂志, 2016, 37(17): 2379-2381.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.008

• 肺炎支原体
• 单克隆抗体
• 胶体金免疫层析法

目的制备抗肺炎支原体(MP)的特异性单克隆抗体,利用单克隆抗体建立MP胶体金快速检测方法。方法采集急性呼吸道感染患儿咽拭子标本,分离培养并鉴定MP,纯化MP抗原,制备抗MP单抗,利用单抗建立MP胶体金检测试纸条。取疑似MP感染患者的咽拭子标本,分别使用荧光定量PCR法和胶体金快速检测法对其进行检测,观察并统计检查结果。结果成功分离培养出MP菌株,灭活并纯化出MP抗原,利用该抗原免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备出抗MP单克隆抗体19株,从中选出效价高、特异性较好的两株单克隆抗体(MP-5和MP-19)作为原材料制备MP胶体金快速检测试纸条。胶体金试纸条最低检测限为20ng。分别采用胶体金试纸条和荧光定量PCR法对临床标本进行检测,结果显示,本研究制备的MP胶体金快速检测法的灵敏度为88.2%,特异度为82.6%。结论制备出抗MP的特异性单克隆抗体,已初步建立MP胶体金快速检测法,并为临床MP感染患者的快速诊断提供帮助。

• 单位
  安康市中心医院; 陕西省人民医院; 中心实验室; 西安交通大学