小窝蛋白3在小鼠糖尿病心肌病中的作用：与内质网应激的关系

作者：张岳甫; 周璐; 苏娃婷; 夏中元; 雷少青^*

来源：中华麻醉学杂志, 2023, 43(04).

• 细胞质膜微囊蛋白
• 糖尿病心肌病
• 内质网应激

目的评价小窝蛋白3(Cav-3)在小鼠糖尿病心肌病中的作用及其与内质网应激的关系。方法在体实验:清洁级健康成年雄性野生型小鼠16只, 体质量18～20 g, 采用随机数字表法分为2组(n=8):对照组(Control组)和糖尿病心肌病组(DCM组), 另取Cav-3 KO小鼠8只为Cav-3 KO+糖尿病心肌病组(Cav-3 KO+DCM组)。采用高脂饮食联合腹腔一次性注射链脲佐菌素100 mg/kg的方法制备小鼠2型糖尿病模型, 8周时采用心脏超声测定小鼠左心射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、左室收缩末期容积(LVESD)、左室舒张末期容积(LVEDD)。随后处死小鼠取心脏, HE染色观察心肌组织形态学结果。离体实验:小鼠来源的HL-1心肌细胞, 采用随机数字表法分为3组(n=6):正常糖培养组(NG组)、高糖组(HG组)和高糖+甲基-β-环糊精组(HG+β-CD组)。高糖模型采用专用培养基加入50%葡萄糖至终浓度达到30 mmol/L, 持续培养36 h。采用LDH、CCK8试剂盒评估细胞损伤情况。采用Western blot法检测心肌组织与HL-1细胞内质网应激相关蛋白结合免疫球蛋白(BiP)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及剪接型X-box结合蛋白1(XBP1-s)的表达。结果在体实验:与Control组比较, DCM组和Cav-3 KO+DCM组小鼠进食量、饮水量及心脏质量/体质量增加, EF和FS降低, LVESD和LVEDD升高, 心肌BiP、CHOP和XBP1-s表达上调, Cav-3表达下调(P<0.05), 病理学损伤加重;与DCM组比较, Cav-3 KO+DCM组EF和FS降低, LVESD和LVEDD升高, 心肌BiP、CHOP与XBP1-s表达上调, Cav-3表达下调(P<0.05), 病理学损伤加重。离体实验:与NG组比较, HG组和HG+β-CD组心肌细胞存活率下降, LDH活性升高, BiP、CHOP与XBP1-s表达上调, Cav-3表达下调(P<0.05);与HG组比较, HG+β-CD组心肌细胞存活率下降, LDH活性升高, BiP、CHOP和XBP1-s表达上调, Cav-3表达下调(P<0.05)。结论 Cav-3表达下调会加重小鼠糖尿病心肌损伤, 其机制与内质网应激过度激活有关。

• 单位
  武汉大学人民医院