抗严重发热伴血小板减少综合征病毒包膜糖蛋白单链抗体的筛选和鉴定

作者：张文帅; 郭喜玲; 迟莹; 焦永军^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2019, 35(01): 78-82.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008747

• 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)
• 抗体文库
• 包膜糖蛋白(Gn)
• 原核表达

目的筛选及表达抗严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)包膜糖蛋白(Gn)单链抗体(scFv)。方法利用人源化SFTSV的scFv文库与固相化包被的SFTSV-Gn蛋白特异性结合,经过4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选能特异性结合SFTSV-Gn蛋白的噬菌体scFv,随机挑取最后一轮单菌落进行噬菌体-ELISA鉴定,将经过测序鉴定正确的阳性克隆转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中原核表达,用Western blot法鉴定scFv的表达, ELISA鉴定纯化后scFv的结合活性。结果筛选出3株不同序列的抗SFTSV-Gn蛋白的scFv, Western blot法结果显示scFv得到正确表达, ELISA结果显示纯化后的scFv具有结合活性。结论成功筛选及表达了抗SFTSV-Gn蛋白的scFv。

• 单位
  江苏省疾病预防控制中心