LINC00963通过miR-214-5p/SEMA4C调控结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

作者：朱萍; 浦春^*; 胡蝶; 张艳珍; 张博超; 马思源; 赵晓晓

来源：沈阳医学院学报, 2023, 25(01): 10-38.

DOI：10.16753/j.cnki.1008-2344.2023.01.003

• LINC00963
• miR-214-5p
• SEMA4C
• 结直肠癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的：探讨基因间长链非编码RNA00963 (LINC00963)对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法：通过LncBase Predicted v.2预测LINC00963和miR-214-5p的调控关系并通过双荧光素酶实验进行验证，StarBase v3.0预测LINC00963和SEMA4C相关性。常规培养结直肠癌细胞系HCT116、 SW480，将结直肠癌细胞分为si-nc组、si-LINC00963组、 miR-nc组、 miR-214-5p mimic组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测LINC00963、 miR-214-5p和SEMA4C的表达水平，细胞计数试剂盒8 (CCK-8)检测细胞增殖，划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。Western blot法检测细胞中SEMA4C蛋白表达水平。结果：通过LncBase Predicted v.2预测发现LINC00963和miR-214-5p存在结合位点，StarBase v3.0显示LINC00963和SEMA4C呈正相关，双荧光素酶报告实验显示LINC00963与miR-214-5p存在相互作用。在HCT116、SW480细胞转染24 h后，与si-nc组比较，si-LINC00963组结直肠癌细胞增殖活力、划痕愈合力和侵袭细胞的数量均减弱，细胞中miR-214-5p表达增高，SEMA4C的mRNA和蛋白表达水平显著下降，差异有统计学意义（P<0.05）；将miR-214-5p mimic同样转染至HCT116、SW480细胞24 h后，与miR-nc组比较，miR-214-5p mimic组miR-214-5p表达增高，SEMA4C的mRNA和蛋白表达水平显著下降，结直肠癌细胞增殖活力、划痕愈合力和侵袭细胞的数量均减弱，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：LINC00963在结直肠癌中呈现高表达，下调其表达可增加miR-214-5p的表达，降低SEMA4C的表达，从而抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  皖南医学院; 皖南医学院弋矶山医院