表达FMDVB7多表位基因的重组PRRSV的拯救与复制水平的测定

作者：白伟杰; 曹轶梅; 包慧芳; 孙普; 付元芳; 李平花; 白兴文; 陈应理; 李坤; 马雪青; 刘在新; 李冬; 卢曾军

来源：中国兽医科学, 2016, (04): 449-453.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2016.04.008

• PRRSV
• 感染性克隆
• FMDV
• B细胞表位
• 病毒载体疫苗 porcine reproductive and respiratory syndrome virus
• infectious clone
• foot-and-mouth disease virus
• Bcell epitope
• viral vector vaccine

利用北美PRRSV Fl12毒株感染性c DNA克隆,在病毒基因组ORF1b和ORF2a之间插入绿色荧光蛋白(EGFP)基因,构建了表达EGFP的重组PRRSV(v Fl12-EGFP)。拯救病毒v Fl12-EGFP感染Marc-145细胞后,可观察到明显的细胞病变和绿色荧光,表明EGFP基因正确表达。随后,采用相同的策略构建了表达口蹄疫病毒(FMDV)B7多表位基因的重组PRRSV(v Fl12-B7),拯救病毒v Fl12-B7感染Marc-145细胞后,可观察到典型的CPE;对拯救病毒进行RT-PCR扩增和序列测定,表明多表位基因正确插入;荧光定量PCR检测,第1代和第4代拯救病毒的拷...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室