Nod样受体蛋白3(NLRP3)在大鼠原代皮质神经元坏死样凋亡中的表达

作者:刘芷含; 陈巍巍; 岳婵娟; 吴明凤; 滕雪; 陈锐; 杨龙; 杜波; 程言博*
来源:徐州医科大学学报, 2017, 37(05): 293-297.
DOI:10.3969/j.issn.1000-2065.2017.05.003

摘要

目的 探讨Nod样受体蛋白3 (NLRP3)在大鼠原代皮质神经元坏死样凋亡中的表达情况。方法 SD大鼠原代皮质神经元细胞培养12天,Q-VD-Oph预处理30 min后缺糖缺氧刺激诱导坏死样凋亡。(1)将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧2 h,复氧3、6、12、24 h,均用Q-VD-Oph处理),Western blot检测NLRP3蛋白表达,生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)水平;(2)将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧0.5、1、1.5、2、3 h,复氧12 h,均用Q-VD-Oph处理),再次进行NLRP3及LDH测定;(3)细胞缺糖缺氧2 h、复氧12 h(用Q-VD-Oph处理)后免疫荧光观察NLRP3的表达。结果 缺糖缺氧2 h后,随着复氧时间的延长,NLRP3在12 h表达量最高,24 h表达量较12 h下降(P<0.05),LDH在12 h的表达量最高。缺糖缺氧时间不同,各组均复氧12 h时,NLRP3在缺糖缺氧2 h表达量最高,3 h蛋白表达量较2 h下降(P<0.05),LDH在2 h的表达量最高。在缺糖缺氧2 h、复氧12 h,细胞免疫荧光强度最高。结论 NLRP3在原代皮质神经元细胞坏死样凋亡中有表达,且随着NLRP3表达量升高,细胞受损程度相应增高。

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