猪伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA抗体检测方法的建立

作者：袁梦; 常巍; 杨世丽; 周海欧; 李翠婷; 马燕梅^*

来源：江西农业学报, 2022, 34(08): 114-121.

DOI：10.19386/j.cnki.jxnyxb.2022.08.022

• 伪狂犬病病毒
• gE蛋白
• 单克隆抗体
• 竞争ELISA抗体检测方法

为了制备抗猪伪狂犬病病毒（PRV）糖蛋白gE的单克隆抗体并制备竞争ELISA猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒，以原核表达系统表达PRV FA株囊膜蛋白gE的主要抗原表位区段（aa52～aa238）的His标签，获得了融合蛋白gE-6×His；将gE-6×His纯化后免疫BALB/c小鼠，取其脾脏制备脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）,进行细胞融合，以感染PRV的PK15细胞的蛋白为样本检测抗体，使用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞系，获得了2株稳定分泌抗PRV gE单克隆抗体的杂交瘤细胞系。结果显示：制备的抗体特异性好，效价为1∶5120；以单克隆抗体为检测抗体建立的竞争ELISA抗体检测方法灵敏、特异。

• 单位
  动物科学学院; 福建农林大学