巴西橡胶树HbHMGR1在开割前后胶乳中的互作蛋白筛选

作者：晁金泉; 赵一杰; 吴绍华; 杨署光; 田维敏^*

来源：分子植物育种, 2021, 19(24): 8151-8159.

DOI：10.13271/j.mpb.019.008151

• 巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)
• Hb HMGR1
• 酵母双杂交
• 互作蛋白
• 荧光定量PCR

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)是调控"碳源"进入类异戊二烯代谢的关键限速酶。天然橡胶是一种类异戊二烯化合物,主要来自于巴西橡胶树(以下简称橡胶树)。割胶是获取天然橡胶的主要方式。在前期研究中,发现了开割树胶乳的橡胶合成效率远高于未开割树。本研究分别构建了未开割树和开割树胶乳的酵母双杂交c DNA文库,利用前期制备的pGBKT7-HbHMGR1诱饵载体分别对两个文库进行互作蛋白筛选,并对得到的阳性克隆进行回转验证。文库构建结果显示两个酵母文库的库容量均在1.2×107CFU以上,平均插入片段均大于1.3 kb,质量较高,可用于后续筛库实验。文库筛选结果显示从未开割树胶乳文库中筛选到3个候选互作蛋白,其中包含HbHMGR1自身(scaffold0419722144),推测割胶前HbHMGR1可能以二聚体形式存在;在开割树胶乳文库中筛选到6个候选互作蛋白,其中包含一个丰度极高的丝氨酸/苏氨酸激酶受体相关蛋白(STRAP, scaffold089147224),表明该蛋白很可能通过与HbHMGR1的结合来调控其活性。本研究为深入认识HbHMGR1在调控"碳源"在橡胶树割胶前后之间的分配模式提供了参考依据。

• 单位
  海南大学; 中国热带农业科学院橡胶研究所