TGF-β1及其抑制剂培养的子宫内膜异位症患者异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭情况观察

作者：于克; 王祝荣^*

来源：山东医药, 2019, 59(18): 10-14.

• 转化生长因子β1
• 子宫内膜异位症
• 子宫内膜间质细胞
• 细胞增殖
• 细胞侵袭
• β-连环蛋白
• cMYC蛋白

目的观察子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)患者异位子宫内膜组织转化生长因子β1(Transforming Growth Factor beta1,TGF-β1) mRNA的表达变化,观察加入TGF-β1及其抑制剂培养的子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖、侵袭能力变化,并探讨可能作用机制。方法 100例EMs患者的异位子宫内膜组织及40例未患有EMs患者的正常子宫内膜组织,采用qRT-PCR法检测TGF-β1mRNA。取异位子宫内膜新鲜组织,分离、培养、鉴定原代ESCs;取对数生长期ESCs分为1、2、3、4组,1、2组分别加入终浓度为2 ng/m L的TGF-β1因子、4μL PBS(TGF-β1因子配制溶剂),3、4组分别加入终浓度为1μmol/L的TGF-β1抑制剂Ly364947、2μL DMSO(Ly364947配制溶剂),培养48 h时采用qRT-PCR法检测各组细胞TGF-β1mRNA,分别于培养0、24、48、72 h时采用MTS法测算各组细胞增殖能力(OD值表示),培养48 h时采用Boyden实验观察各组细胞侵袭能力,培养48 h时采用Western blotting法检测各组细胞β-连环蛋白(β-catenin)、cMYC蛋白。结果 EMs患者异位子宫内膜组织、正常子宫内膜组织TGF-β1mRNA相对表达量分别为2. 26±0. 96、1. 02±0. 38(t=7. 908,P <0. 05)。培养48 h时1、2组细胞TGF-β1mRNA相对表达量分别为8. 88±1. 03、1. 00±0. 02(P <0. 05),3、4组细胞TGF-β1mRNA相对表达量分别为0. 57±0. 07、1. 00±0. 04(P <0. 05);与2组比较,培养48、72 h时1组细胞OD值升高(P均<0. 05),与4组比较,培养48、72 h时3组细胞OD值降低(P均<0. 05);培养48 h时1、2组细胞穿膜数分别为73. 98±10. 32、50. 67±8. 94(P <0. 05),3、4组细胞穿膜数分别为28. 04±7. 99、53. 17±10. 52(P <0. 05);培养48 h时,与2组比较,1组细胞β-catenin、cMYC相对表达量增加(P <0. 05),与4组比较,3组细胞β-catenin、cMYC相对表达量降低(P <0. 05)。结论 EMs患者异位子宫内膜组织TGF-β1mRNA表达升高。加入TGF-β1的ESCs细胞增殖、侵袭能力增加,β-catenin、cMYC蛋白表达升高;加入TGF-β1抑制剂的的ESCs细胞增殖、侵袭能力降低,β-catenin、cMYC蛋白表达降低。TGF-β1可能通过促进β-catenin、cMYC蛋白的表达,激活wnt/β-catenin信号通路,促进ESCs的增殖、侵袭。