人胸苷激酶基因cDNA克隆

作者：丁克祥; 郑永晨; 吴朝阳; 王攀; 张杰; 胡燕祝; 吕沅津

来源：中国老年学杂志, 2004, (10): 932-934.

• 人胸苷激酶
• cDNA
• TA克隆

目的　克隆人胸苷激酶基因cDNA。方法采用逆转录PCR方法扩增胸苷激酶cDNA ,用十二烷基氟波酯 (TPA)刺激人外周血细胞的mRNA为模板 ;扩增的PCR产物经TA克隆重组和内切酶鉴定 ,以及DNA序列分析确定克隆基因的序列。结果经逆转录PCR扩增出一个 70 0bp左右的DNA片段 ,TA克隆出现 1 6个阳性克隆 ,选择其中的一个克隆 (TKTA8)进行DNA序列分析 ,序列分析结果表明TKTA8克隆重组的序列是人胸苷激酶的cDNA序列。结论从外周血细胞中得到了hTK完整的开放读码框架。

• 单位
  武汉理工大学; 吉林大学第二医院; 武汉大学人民医院; 南方医科大学; 中心实验室; 湖南大学