硒代胱氨酸减轻小鼠短暂局灶性脑缺血再灌注损伤的研究

作者：王琨; 倪鸣岳; 王琰; 孙磊; 孔德焕; 倪庆宾^*

来源：中华行为医学与脑科学杂志, 2020, 29(10).

• 硒代胱氨酸
• 短暂局灶性脑缺血再灌注
• 氧化应激
• 细胞凋亡

目的探讨硒代胱氨酸(SeC)对小鼠短暂局灶性脑缺血再灌注(transient focal cerebral ischemia/reperfusion, tFCI/R)损伤的神经保护作用及机制。方法线栓阻塞昆明小鼠大脑中动脉1 h后拔除, 制作tFCI/R模型。通过多普勒血流监测和神经功能缺损评分筛选手术合格小鼠40只, 按照随机数字表法分为SeC治疗组和tFCI/R模型对照组;另选20只作为假手术组(Sham组, 小鼠经历手术全程而不阻塞大脑中动脉)。SeC治疗组小鼠给予术后0 h、24 h、48 h各1次腹腔注射SeC溶液(2 mg/30 g);模型组和Sham组小鼠给予同样方式注射等量生理盐水。于术后24 h、48 h、72 h每组各随机抽取6只小鼠进行神经功能缺损评分及神经行为学测试;之后所有小鼠麻醉处死取脑, 行氯代三苯基四氮唑(TTC)染色测脑梗死体积, 湿-干重法测脑水肿程度变化, Tunel-DAPI染色观察神经元凋亡情况, Western blot检测活性caspase-3和PARP表达, 并检测小鼠脑组织GSH、GSH-Px表达情况。结果 Sham组小鼠未见神经功能缺损表现, 术后24 h、48 h、72 h的tFCI/R组Zea Longa评分[(3.67±0.52)分, (3.33±0.52)分, (2.17±0.41)分]均比Sham组[(0.50±0.55)分, (0.67±0.52)分, (0.33±0.52)分]显著提高(t=10.26, 8.86, 6.81, 均P<0.05), 而SeC治疗组评分[(2.50±0.55)分, (1.67±0.82)分, (0.83±0.75)分]则比tFCI/R组显著降低(t=3.74, 4.19, 3.84, 均P<0.05)。行为学评测结果与Zea Longa评分一致。术后72 h TTC染色显示:与tFCI/R组[(24.69±2.25)%]比较, SeC治疗组[(11.89±1.64)%]脑梗死体积明显缩小, 差异有统计学意义(t=10.28, P<0.05);Sham组无梗死灶形成。湿-干重测量显示:与Sham组相比, tFCI/R组左侧脑组织含水量[(85.87±1.36)%]明显增加(t=8.73, P<0.05), SeC治疗组左侧脑组织含水量[(81.06±1.07)%]与tFCI/R组比较下降, 差异有统计学意义(t=6.22, P<0.05)。Tunel-DAPI染色、Western blot结果表明, SeC处理显著下调了caspase-3和PARP的裂解, 从而抑制了神经元凋亡。脑组织GSH含量检测证实, 与tFCI/R组[(64.69±2.15)%]比较, SeC治疗组GSH含量[(85.83±1.46)%]显著提高, 差异有统计学意义(t=18.19, P<0.05)。脑组织GSH-Px活性检测证实, 与tFCI/R组[(38.74±1.93)%]比较, SeC治疗组GSH-Px活性[(49.12±1.13)%]显著提高, 差异有统计学意义(t=10.38, P<0.05)。结论 SeC通过抑制氧化应激和凋亡, 对tFCI/R诱导的脑损伤发挥了有效的神经保护作用, 据此推测SeC在脑卒中的防治方面具有潜在的应用价值。

• 单位
  安徽医科大学; 泰安市中心医院