内皮抑素重组腺病毒表达载体的构建及其对血管内皮细胞增殖特性的影响

作者：唐辉; 刘旭盛; 梁晚益; 李金玺; 张小蓉; 黄跃生

来源：第三军医大学学报, 2006, (09): 883-885.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2006.09.006

• 内皮抑素
• 腺病毒载体
• 内皮细胞
• 增殖 endostatin
• adenoviral vector
• endothelium
• proliferation

目的构建含有人内皮抑素(endostatin,ES)基因的重组腺病毒Ad/hEnd,并探讨与感染该病毒的角朊细胞共培养时内皮细胞增殖特性的改变。方法以人胎肝组织mRNA为模板,通过RT-PCR及PCR获得ES基因序列,插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,获得重组质粒pAdTrack-ES。经鉴定后将阳性重组子转化至pAdeasy1受体菌,筛选阳性克隆。脂质体介导转染293细胞,获取Ad/hEnd,经PCR鉴定及上清中ES含量检测后,感染角朊细胞,并采用套皿法与内皮细胞共培养,测定培养液中ES含量、内皮细胞凋亡及细胞抑制率。结果成功获取Ad/hEnd,病毒滴度可达1.65×1012p...

• 单位
  创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 第三军医大学西南医院