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摘要
目的探讨TRIM22在胶质瘤中的表达模式及功能。方法收集30例胶质瘤患者的胶质瘤组织以及胶质瘤旁正常组织,并通过qRT-PCR和Western blotting检测TRIM22在胶质瘤组织和细胞系中的表达情况。为验证敲除TRIM22基因对U87细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,将实验分为3组:Con-shRNA组、shRNA-TRIM22组和shRNA-TRIM22+Li Cl组。ConshRNA组细胞共转染p MSCV-TRIM22质粒和对照shRNA,shRNA-TRIM22组细胞共转染p MSCV-TRIM22质粒和sh-TRIM22,shRNA-TRIM22+Li Cl组细胞共转染10μmol/L Li Cl+p MSCV-TRIM22质粒和sh-TRIM22。通过CCK-8比色法测定细胞增殖;Transwell分析细胞的迁移和侵袭情况; Western blotting检测上皮-间充质转化过程(EMT过程)标志蛋白(E-cadherin和Vimentin)和Wnt/β-catenin通路标志蛋白(cyclin D1和c-Myc蛋白)的表达水平。结果与胶质瘤旁正常组织相比,胶质瘤患者组织样本中TRIM22蛋白和mRNA的表达水平均显著提高(P <0.01)。与Con-shRNA组相比,shRNA-TRIM22组U87细胞中TRIM22的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P <0.01); EMT过程标志蛋白E-cadherin的表达水平显著升高(P <0.01),Vimentin蛋白表达水平显著降低(P <0.01); U87细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(P <0.05)。与Con-shRNA组相比,shRNA-TRIM22组U87细胞中cyclin D1和c-Myc蛋白的表达水平显著降低(P <0.01);与shRNA-TRIM22组相比,shRNATRIM22+Li Cl组U87细胞中cyclin D1和c-Myc蛋白的表达水平显著升高(P <0.01),U87细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著升高(P <0.01)。结论 TRIM22基因敲除抑制了U87细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT过程,提示TRIM22在胶质瘤中可能是一个潜在的致癌基因。
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单位中国人民解放军空军军医大学; 唐都医院; 陕西省康复医院
