红色毛癣菌pho88基因的克隆及生物信息学分析

作者：刘鹏; 岑妍慧; 林江^*; 兰太进; 梁忠秀; 韩丝银; 陈振兴

来源：生物技术, 2019, 29(04): 309-323.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.04.0053

• 红色毛癣菌
• 无机磷酸盐转运蛋白
• 基因克隆
• 生物信息学分析

[目的]克隆红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)无机磷酸盐转运蛋白(Inorganic phosphate transporter,PHO88)基因,构建原核表达质粒,并对PHO88蛋白进行生物信息学分析。[方法]根据Gen Bank公布的T. rubrum CBS 118892菌株pho88基因序列(XP-003235348),设计合成特异性引物,提取红色毛癣菌总RNA,反转录为c DNA,PCR扩增pho88基因,构建到原核表达载体p ET-28a上,测序鉴定其序列,并对其进行生物信息学分析。[结果]红色毛癣菌pho88基因全长582 bp,编码193个氨基酸。PHO88蛋白含有1个跨膜结构域,细胞亚定位为分泌信号途径蛋白,PHO88含有16个磷酸化修饰位点,其二级结构主要由α-螺旋构成,高级结构为全α型蛋白质。[结论]成功克隆红色毛癣菌pho88基因及构建原核表达质粒,为后续PHO88蛋白的诱导表达奠定基础,为后续开发靶向PHO88的抗真菌药物,提供实验基础。

• 单位
  广西中医药大学; 基础医学院