牛呼吸道合胞体病毒RT-LAMP检测方法的建立

作者：李家伟; 王建科; 张淑琴; 张加力^*; 郭利^*

来源：中国兽医学报, 2019, 39(05): 867-871.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.05.10

• 牛呼吸道合胞体病毒
• 环介导等温扩增技术
• 检测方法

牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)是引起牛呼吸道疾病的一种病毒性病原体。本研究建立一种利用环介导等温扩增技术(RT-LAMP)快速检测BRSV的新的方法,针对BRSV N基因(GeneBank:AF054668.1)设计4对特异性LAMP引物,每组引物特异性识别靶基因序列上4个独立区域,利用扩增靶DNA的Bst2.0 DNA聚合酶,63℃恒温水浴50 min完成病毒检测,使用钙黄绿素检测荧光目视和琼脂糖凝胶电泳方法,同时对牛的其他主要病毒进行特异性检测,结果证明特异性好。该RT-LAMP检测方法的灵敏度达到BRSV模板稀释的10-6倍,可成功检测到临床样本中的BRSV基因组,为BRSV的临床检测提供了一种快速的试验手段,更适合BRS的诊断和临床现场快速检测。

• 单位
  吉林农业大学; 中国农业科学院特产研究所