摘要

目的:探讨MiR-155通过对HuR的调控参与结肠癌细胞转移的机制。方法:研究使用HCT-116结肠癌细胞系,分为miR-155模拟物和miR-155抑制剂、miRNA模拟物阴性对照和miRNA抑制物阴性对照组。MTT、伤口愈合试验、菌落形成测定、细胞周期分析和流式细胞术测定检测细胞活力、周期、迁移和凋亡。qPCR和蛋白质印迹法测量细胞中细胞miR-155的表达水平,蛋白质印迹法测量细胞中细胞HuR的表达水平,荧光素酶报告基因测定相关靶点。结果:与对照组比较,用miR-155模拟物转染后,miR-155水平升高;转染miR-155模拟物72h后细胞活力增加,菌落数增加,miR-155模拟物增加了S期细胞的百分比,miR-155模拟物抑制结肠癌细胞的凋亡,转染miR-155模拟物的细胞的迁移率增加,明确miR-155模拟物促进了结肠癌细胞的迁移。用miR-155抑制剂转染后,结果相反。用miR-155抑制剂转染后HuR的mRNA水平降低,转染miR-155模拟物后,HuR的mRNA水平升高。荧光素酶报告基因测定miR-155与HuR的3′UTR结合,并且HuR是miR-155的直接靶标。结论:结果表明miR-155促进结肠癌细胞增殖,增强其集落形成能力,促进其细胞周期进程,抑制细胞凋亡,促进了结肠癌细胞的迁移。HuR被确定为miR-155的新靶点。

  • 单位
    荆楚理工学院