N-乙酰半胱氨酸对HT22细胞辐射诱导氧化应激及增殖和凋亡的影响

作者：黄越; 陈乃耀^*; 赵辉; 闫振宇; 张海霞; 赵雪聪; 张丁平

来源：辐射防护, 2021, 41(02): 165-173.

• 电离辐射
• HT22
• 氧化应激
• NAC
• 细胞凋亡

为探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对辐射相关氧化应激和海马神经元HT22细胞的增殖及凋亡的影响。首先选用不同剂量(0、2、4、6、8、10、12 Gy)的X射线分别照射HT22细胞,筛选出最佳照射剂量(10 Gy),然后进行实验分组:空白对照(Control)组,单纯照射(RT)组,照射+NAC(RT+NAC)组,照射后继续培养24 h后,CCK-8法检测细胞增殖、Annexin V/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况; DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平以评估细胞内氧化应激程度,比色法测定细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,Western blot检测Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达变化。结果表明,(1) 2 Gy的照射对细胞增殖的影响不明显,当辐射剂量大于2 Gy时,随着辐射剂量的增高,HT22细胞增殖率明显降低(p<0.05);辐射剂量达10 Gy时,细胞增殖抑制率接近50%,因此将10 Gy作为实验最佳辐射剂量。(2)给予10 Gy X射线照射前给予NAC预处理可明显增加HT22细胞的增殖率(p<0.01)。(3)给予10 Gy X射线照射可明显增加细胞内ROS、MDA含量(p<0.01),减少细胞内GSH含量和SOD的活力(p<0.01),促进凋亡蛋白Bax、Cleaved-caspase-3的表达(p<0.01),细胞凋亡率显著增加(p<0.01); NAC可减少照射后细胞内ROS和MDA含量(p<0.01),提高GSH水平及SOD活性(p<0.01),显著减少凋亡蛋白的表达和细胞凋亡。以上结果表明NAC可抑制辐射相关氧化应激,减少辐射对HT22细胞增殖抑制,减少细胞凋亡。

• 单位
  天津商业大学; 华北理工大学