来自Staphylococcus aureus N315的2-脱氧-D-核糖5-磷酸醛缩酶的工程菌构建、表达纯化与性质鉴定

作者：韩磊; 陈曦; 冯进辉; 吴洽庆; 朱敦明

来源：生物加工过程, 2013, (01): 47-53.

• 2-脱氧-d-核糖5-磷酸醛缩酶
• 基因挖掘
• 金黄色葡萄球菌 2-deoxy-d-ribose 5-phosphate aldolase
• genome mining
• Staphylococcus aureus

利用基因挖掘在数据库中发现一种来自Staphylococcus aureus N315的潜在DERA(SaDERA),将其基因密码子优化后实现了在大肠杆菌中的表达,重组酶经纯化后研究了其催化性质。结果表明:构建的工程菌具有较高的可溶表达量(占总蛋白的70%),通过简单的一步纯化即可得到电泳纯的酶;SaDERA是一种同源二聚体的酶(5.7×104),其最适反应条件是pH 7.7和45℃;SaDERA具有良好的碱耐受性,在pH 11.0、25℃的条件下温浴24 h后仍有93%的残余活力;SaDERA具有良好的乙醛耐受性,在0.3 mol/L乙醛浓度、25℃下,30 min内保持了70%以上的残余活...

• 单位
  中国科学院天津工业生物技术研究所