miR-3613-3p通过调节SDF1/CXCR4通路对非小细胞肺癌细胞A549凋亡的影响

作者：王晓明; 王晓蓉; 王敏; 王坤^*

来源：标记免疫分析与临床, 2020, 27(09): 1504-1509.

• miR-3613-3p
• 基质细胞衍生因子1/趋化因子受体4通路
• A549
• 细胞凋亡

目的探讨miR-3613-3p通过调节基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1, SDF-1)/趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type 4, CXCR4)通路对A549细胞凋亡的影响。方法运用TargetScan在线分析miR-3613-3p与CXCR4的相关性:将CXCR4的3端非编码区克隆进pMIR-REPORT Luciferase载体,利用双荧光素酶报告系统检测miR-3613-3p是否靶向调控CXCR4;转染miR-3613-3p mimics或者miR-3613-3p inhibitor进A549细胞,通过免疫印迹法检测SDF1/CXCR4通路相关蛋白和凋亡标志蛋白的表达量;同时采用Annexin V染色法测定细胞凋亡水平。结果TargetScan分析后,miR-3613-3p仅在一个区域与CXCR4具有较高匹配度;通过双荧光素酶报告系统发现,miR-3613-3p靶向结合CXCR4的3端非编码区;梯度转染miR-3613-3p mimics时,CXCR4、cleaved-caspase3/caspase3、cleaved-caspase9/caspase9表达量下降,BAX表达量上升,Bak表达量下降,细胞凋亡水平下降(0.206±0.033 vs 0.062±0.015,P=0.021);而用梯度转染miR-3613-3p inhibitor时,CXCR4、cleaved-caspase3/caspase3的表达量上升, cleaved-caspase9/caspase9、BAX表达量下降,Bak表达量上升,细胞凋亡水平上升(0.201±0.017 vs 0.613±0.061,P=0.019);外源SDF-1刺激的同时转染miR-3613-3p inhibitor,细胞凋亡水平没有明显变化(0.204±0.029 vs 0.197±0.030,P=0.82)。结论 miR-3613-3p通过抑制SDF1/CXCR4通路抑制非小细胞肺癌细胞A549的凋亡。

• 单位
  上海东方肝胆外科医院; 上海电力医院