健脾益肾化痰方通过VEGF/PI3K/AKT/FOXO1诱导肺鳞癌SK-MES-1细胞自噬的实验研究

作者：管未峰; 王志光^*; 王超; 卓少元; 廖文滔

来源：中药药理与临床, 2023, 39(09): 19-23.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.20230506.002

• 健脾益肾化痰方
• 肺鳞癌
• 自噬
• 肿瘤微环境
• 内皮细胞转化因子VEGF/磷酸肌醇-3蛋白激酶/蛋白激酶/FOXO1

目的:观察健脾益肾化痰方含药血清对肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖、凋亡、自噬及SK-MES-1细胞内Beclin1、LC3、VEGFR、PI3K、AKT、FOXO1相关蛋白的影响，探讨健脾益肾化痰方通过上述蛋白诱导肺鳞癌细胞SK-MES-1自噬的可能作用机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、32.2 g/kg健脾益肾化痰方组，各组分别灌胃生理盐水或药物，连续7 d后收集血清；采用CCK-8法测定人肺鳞癌细胞株的存活率；用流式细胞仪检测细胞凋亡；激光共聚焦显微镜观察GFP-LC3脂质体转染干预肺鳞癌细胞后自噬发生情况；Western Blot法检测对人肺鳞癌细胞株SK-MES-1细胞Beclin1蛋白和LC3B-Ⅱ、LC3B-Ⅰ、VEGFR、PI3K、AKT、FOXO1相关蛋白表达的影响。结果:32.2 g/kg健脾益肾化痰方含药血清各浓度组均能够有效抑制肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖，其抑制率与药物浓度呈正相关；与正常对照组相比，32.2 g/kg健脾益肾化痰方16%含药血清组使SK-MES-1细胞凋亡率明显增高(P<0.05);8%、16%含药血清组自噬小体显著增多(P<0.05);16%含药血清组SK-MES-1细胞内自噬相关蛋白Beclin1、LC3B-Ⅱ、LC3B-Ⅰ表达显著上调(P<0.01);FOXO1蛋白表达显著上调，VEGFR、PI3K、AKT蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论:健脾益肾化痰方含药血清能够诱导肺鳞癌SK-MES-1细胞发生自噬，其作用机制可能是通过调节VEGF/PI3K/AKT/FOXO1信号通路，上调SK-MES-1细胞内Beclin1、LC3蛋白表达，促进LC3B-Ⅰ转化为LC3B-Ⅱ有关。

• 单位
  广西中医药大学第一附属医院; 广西中医药大学