科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 通过单抗敲低或过继自然杀伤(NK)细胞，探讨NK细胞在血吸虫病肝纤维化中的作用。方法 24只C57BL/6健康小鼠取肝脏，制备NK细胞，用白细胞介素-15 (IL-15)、IL-2、IL-18活化NK细胞。40只C57BL/6健康小鼠随机分为单抗组、IgG组、生理盐水组、NK细胞组、PBS组等5组，每组8只，每鼠经腹部贴片感染日本血吸虫尾蚴(20±1)条。单抗组、IgG组和生理盐水组小鼠于感染前1周开始，每周分别尾静脉注射1次抗NK1.1单抗(100μg/鼠)、IgG (100μg/鼠)、生理盐水，每次200μl/鼠；NK细胞组和PBS组小鼠于感染后4周开始，每周分别尾静脉注射1次活化的NK细胞(1×105/鼠)、PBS，每次200μl/鼠。感染后6和8周，分别取各组小鼠肝脏，流式细胞术检测小鼠肝NK细胞比例变化，Masson染色观察肝组织纤维化变化，荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原蛋白(Ⅰ-C)、Ⅲ-C、Ⅳ-C、层黏连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN) mRNA相对转录水平等肝纤维化指标。结果感染后6周，单抗组肝NK细胞比例为(2.56±0.47)%，低于IgG组的(4.75±0.62)%和生理盐水组的(5.35±0.40)%(F=31.59,P<0.01)；感染后8周，单抗组、IgG组和生理盐水组NK细胞比例分别为(2.65±0.23)%、(3.43±0.46)%和(3.56±0.46)%，差异无统计学意义(F=4.48,P>0.05)。感染后6、8周，NK细胞组肝NK细胞比例分别为(5.58±0.30)%、(3.73±0.42)%，与PBS组的(5.51±0.27)%、(2.32±0.40)%差异均无统计学意义(t=0.25、2.64,P>0.05)。感染后6、8周，单抗组肝纤维化面积分别为(8.42±1.30)×104、(9.55±1.55)×104μm2，均大于IgG组的(6.40±1.40)×104、(6.11±1.10)×104μm2和生理盐水组的(6.73±1.61)×104、(6.62±1.60)×104μm2 (F=13.63、30.33,P<0.01)。感染后6周，NK细胞组肝纤维化面积为(5.97±0.96)×104μm2，小于PBS组的(8.27±1.62)×104μm2 (t=4.85,P<0.01)；感染后8周，NK细胞组、PBS组肝纤维化面积分别为(6.33±0.98)×104μm2、(6.97±1.11)×104μm2，差异无统计学意义(t=1.80,P>0.05)。感染后6周，单抗组Ⅳ-C、LN、FN mRNA相对转录水平分别为1.81±0.47、1.63±0.38和1.41±0.16，较IgG组的1.00±0.35、0.81±0.29、0.79±0.16和生理盐水组的1.00±0.12、1.00±0.10、1.00±0.14均上调(F=8.30、8.25、14.40,P<0.01)；感染后8周，单抗组Ⅳ-C mRNA相对转录水平为1.66±0.21，较IgG组的0.94±0.26和生理盐水组的1.00±0.09均上调(F=15.95,P<0.01)。感染后6周，NK细胞组Ⅰ-C、Ⅲ-C、LN mRNA相对转录水平分别为0.66±0.12、0.61±0.06、0.64±0.09，较PBS组的1.01±0.14、1.01±0.14、1.01±0.16均下调(t=3.36、4.41、3.59,P<0.05)；感染后8周，NK细胞组Ⅰ-C、Ⅲ-C、LN m RNA相对转录水平分别为0.82±0.40、0.93±0.37、0.73±0.30，与PBS组的1.04±0.38、1.02±0.25、1.06±0.49相比，差异无统计学意义(t=0.55、0.27、0.81,P>0.05)。结论 小鼠感染日本血吸虫后肝NK细胞在肝纤维化形成早期可发挥抑制肝纤维化的作用。
- 单位
