摘要
目的检测精子相关抗原6(Spag6)在肝癌组织中的表达情况及其与肝癌患者临床病理特征和预后的关系,探讨Spag6对肝癌细胞HCCLM3增殖和迁移的影响。方法选取2006年8月-2009年11月来自中南大学湘雅医院的102例肝癌患者组织样本进行研究,应用Western Blot检测肝癌细胞系、正常肝组织、肿瘤组织及对应的癌旁组织中Spag6表达水平。利用免疫组化法检测102例肝癌组织中Spag6的表达,并根据肿瘤组织免疫组化评分标准分成Spag6高表达组和低表达组。用慢病毒介导的RNAi干扰技术沉默Spag6基因在HCCLM3细胞中的表达,Western Blot检测沉默效果;利用细胞划痕愈合实验检测沉默Spag6基因后对HCCLM3细胞迁移的影响,集落形成实验观察对细胞增殖的影响。采用χ2检验分析Spag6表达水平与肝癌患者临床病理特征的关系;利用Kaplan-Meier生存分析、log-rank检验分析Spag6表达水平与肝癌患者预后的关系。结果 Spag6在肝癌细胞系和肝癌组织中表达高于正常LO2细胞以及正常肝组织。免疫组化结果显示102例标本中肝癌组织的Spag6的表达率为58.8%(60/102),癌旁组织中Spag6的表达率为12.7%(13/102),差异有统计学意义(χ2=47.123,P<0.001)。Spag6的表达水平与肿瘤结节数目、有无包膜、血管侵犯、Edmondson-Steiner分级有关(χ2值分别为8.360、6.761、4.344、7.172,P值分别为0.004、0.009、0.037、0.007)。进一步研究显示Spag6高表达组的1、3、5年生存率明显低于低表达组(71.5%vs 90.5%,43.7%vs 68.8%,19.79%vs48.7%;χ2=11.228,P=0.001)。细胞实验证实沉默Spag6基因后HCCLM3细胞增殖和迁移能力明显减弱(P值均<0.01)。结论Spag6在肝癌细胞及肝癌组织中均呈高表达,且其高表达与肝癌不良临床病理特征以及术后生存有关;Spag6能够促进肝癌细胞增殖和迁移运动,提示Spag6参与了肝癌的发生发展,可作为判断肝癌患者预后的参考指标以及治疗的可能靶点。
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