miR-451通过调控Rho/ROCK1信号通路对乳腺癌细胞糖酵解及凋亡的影响

作者：冯东旭; 吴炜^*; 高平发; 王军; 施丽娟; 陈大伟; 李文兵; 张美峰

来源：国际肿瘤学杂志, 2023, 50(08).

• 乳腺肿瘤
• miR-451
• Rho/ROCK1通路
• 糖酵解
• 细胞凋亡

目的探究miR-451通过调控Rho/ROCK1信号通路对乳腺癌细胞糖酵解及凋亡的影响。方法将乳腺癌MCF7细胞分为乳腺癌细胞(BC)组、乳腺癌细胞+miR-451-NC(MN)组、乳腺癌细胞+miR-451 inhibitor(MI)组、乳腺癌细胞+miR-451 mimic(MM)组、乳腺癌细胞+溶血磷脂酸(BL)组、乳腺癌细胞+法舒地尔(BF)组、乳腺癌细胞+miR-451 mimic+法舒地尔(MF)组。用葡萄糖摄取检测试剂盒和乳酸检测试剂盒检测细胞糖酵解, DAPI染色法检测细胞凋亡, 蛋白质印迹法检测Rho/ROCK1通路蛋白表达, 双荧光素酶报告实验证实miR-451和Rho/ROCK1的相互作用。结果 BC组、MN组、MI组、MM组细胞葡萄糖摄取量分别为(14.22±2.36)×105 mg/h、(14.20±2.37)×105 mg/h、(21.55±2.43)×105 mg/h、(6.19±1.34)×105 mg/h(F=5.30, P<0.001), 乳酸生成量分别为(1.52±0.21)×105 μg/h、(1.53±0.22)×105 μg/h、(2.05±0.32)×105 μg/h、(0.54±0.12)×105 μg/h(F=3.28, P=0.008), 凋亡率分别为(10.13±1.35)%、(10.16±1.37)%、(5.36±1.24)%、(28.47±2.56)%(F=6.36, P<0.001), Rho蛋白相对表达量分别为2.31±0.46、2.32±0.41、2.95±0.35、1.05±0.25(F=2.86, P=0.017), ROCK1蛋白相对表达量分别为2.51±0.41、2.52±0.42、3.05±0.33、1.15±0.13(F=2.43, P=0.035), MN组和MI组、MN组和MM组、MI组和MM组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。BC组、BL组、BF组细胞葡萄糖摄取量分别为(14.22±2.36)×105 mg/h、(21.54±2.40)×105 mg/h、(6.20±1.35)×105 mg/h(F=5.33, P<0.001), 乳酸生成量分别为(1.52±0.21)×105 μg/h、(2.01±0.30)×105 μg/h、(0.55±0.12)×105 μg/h(F=3.28, P=0.008), 凋亡率分别为(10.13±1.35)%、(5.34±1.22)%、(28.44±2.54)%(F=6.45, P<0.001), Rho蛋白相对表达量分别为2.31±0.46、2.94±0.45、1.01±0.24(F=2.40, P=0.037), ROCK1蛋白相对表达量分别为2.51±0.41、3.08±0.42、1.13±0.12(F=2.38, P=0.039), 3组间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。MF组细胞葡萄糖摄取量为(3.21±0.89)×105 mg/h, 乳酸生成量为(0.33±0.04)×105 μg/h, 凋亡率为(38.01±2.87)%, Rho蛋白相对表达量为0.55±0.14, ROCK1蛋白相对表达量为0.51±0.10, MM组、BF组、MF组3组间差异均有统计学意义(F=4.53, P=0.001;F=4.26, P=0.002;F=6.12, P<0.001;F=4.06, P=0.002;F=9.72, P<0.001), MF组与BF组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示, 转染miR-451后可显著降低ROCK1-3′-UTR-WT的荧光素酶活性(0.59±0.03比1.01±0.05, t=17.64, P<0.001), 但对突变基因无显著影响(1.01±0.07比1.02±0.04, t=0.30, P=0.767)。结论过表达miR-451可显著抑制乳腺癌细胞糖酵解, 并促进乳腺癌细胞凋亡, 其机制可能与抑制Rho/ROCK1信号通路有关。

• 单位
  上海健康医学院