摘要
目的:探讨miR-194靶向Bmi-1调控PI3K/Akt信号通路对脑胶质瘤细胞迁移和凋亡的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测miR-194在脑胶质瘤组织和脑胶质瘤细胞中的表达;Transwell迁移实验检测miR-194对U251细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测miR-194对U251细胞凋亡率的影响;免疫组织化学法检测Bmi-1在脑胶质瘤组织中的表达;qRT-PCR检测Bmi-1在脑胶质瘤细胞中的表达;TargetScan预测miR-194与Bmi-1的结合位点;双荧光素酶报告基因检测miR-194与Bmi-1的相互作用关系;Transwell迁移实验检测miR-194靶向Bmi-1对U251细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测miR-194靶向Bmi-1对U251细胞凋亡率的影响;Western blot检测miR-194靶向Bmi-1对PI3K/Akt通路相关蛋白的影响。结果:miR-194在脑胶质瘤组织和脑胶质瘤细胞中呈低表达(P<0.01);过表达miR-194,U251细胞迁移能力下降(P<0.01),凋亡率提高(P<0.05);miR-194与Bmi-1存在靶向关系,且两者相互抑制;Bmi-1在脑胶质瘤组织和脑胶质瘤细胞中呈高表达(P<0.01);过表达miR-194可逆转Bmi-1过表达引起的U251细胞迁移能力增强(P<0.01);过表达miR-194可逆转Bmi-1过表达引起的U251细胞凋亡率下降(P<0.01);过表达Bmi-1,PI3K和Akt蛋白磷酸化程度增强,过表达miR-194可逆转这一现象。结论:过表达miR-194可抑制Bmi-1表达,降低PI3K和Akt蛋白磷酸化程度,抑制脑胶质瘤细胞迁移,促进其凋亡。
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单位河北大学附属医院