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摘要
目的探讨宫颈癌He La细胞外泌体对细胞迁移和侵袭的影响及Wnt/β-catenin信号通路机制。方法采用胎牛血清派样He La细胞,使用胰蛋白酶消化后培养上清液,离心后磷酸盐缓冲液沉淀,得到He La细胞外泌体。电镜观察外泌体形态表现,Western blottig检测外泌体内蛋白表达情况。检测细胞侵袭能力和迁移能力,检测Wnt/β-catenin信号通路中蛋白表达水平。结果使用透射电镜观察可发现,细胞上清液中有直径为40～100nm、圆形及椭圆形的囊泡状小体,检测后可在其内部发现大量CD63和CD81蛋白,说明He La细胞内物质为外泌体。使用荧光标记He La细胞外泌体,培养24h后,使用聚焦荧光显微镜观察,对照组无标记外分泌附着,研究组有标记外分泌附着。研究组He La细胞侵袭数多于对照组,He La细胞迁移距离长于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。研究组蛋白Wnt1、β-catenin和TCF4表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论宫颈癌He La细胞外泌体能增强肿瘤细胞迁移和侵袭,调控增强Wnt/β-catenin信号通路中蛋白表达。
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单位大连市妇幼保健院
