EB病毒BZLF1基因表位疫苗的预测及构建

作者：丁一; 李昆芳; 薛庆节; 屈艳琳^*

来源：中国病原生物学杂志, 2023, 18(01): 12-18.

DOI：10.13350/j.cjpb.230103

• EB病毒
• BZLF1
• 生物信息学
• 抗原表位

目的 采用生物信息学方法预测EB病毒BZLF1基因编码蛋白的结构、抗原表位及疫苗的初步构建，为EB病毒相关疾病的疫苗的研制提供依据。方法 通过NCBI获得EB病毒BZLF1蛋白的核苷酸序列和氨基酸序列，采用ORF Finder、Protparam、SOPMA、DTU Health Tech、TMHMM-2.0、Cell-PLoc 2.0、NetPhos 3.1 Servera、NetNGlyc、SWISS MODE、Immunomedicine Group、IEDB、BLAST、Uniprot等生物信息学软件对EB病毒BZLF1蛋白的理化性质、亲疏水性、结构域、信号肽、跨膜区、亚细胞定位、磷酸化及糖基化位点、二级结构、三级结构、抗原决定簇、B细胞与T细胞抗原表位、蛋白同源性及相互作用蛋白进行预测分析。在T4DNA连接酶作用下连接BZLF1基因与穿梭表达载体pMV261,对连接产物进行PCR及双酶切鉴定。结果 BZLF1蛋白是由245个氨基酸组成的亲水蛋白，分子式为C1185H1850N332O366S8,相对分子质量为26.860×103,理论等电点为5.25,脂肪族氨基酸指数为71.35,平均亲水系数为-0.529;该蛋白二级结构以无规则卷曲居多，占51.84%,无信号肽和跨膜区，存在18个磷酸化位点，2个糖基化位点，含有1个碱性亮氨酸拉链结构。预测该蛋白有9个抗原决定簇，8个B细胞优势抗原表位，9个CTL细胞优势表位，8个Th细胞表位，与人类环状amp反应元件结合蛋白相似度为6.12%,同源性较低。PCR及双酶切鉴定含BZLF1基因的pMV261载体构建正确。结论 生物信息学预测BZLF1属于亲水蛋白，热稳定性较好。该蛋白含有多个磷酸化位点可参与相关信号通路，对疾病的发展起到重要作用。BZLF1含有多个B、T细胞抗原表位，且与人体蛋白同源性低，不易发生免疫交叉反应，可作为EB病毒候选疫苗表位。

• 单位
  济宁医学院; 基础医学院