LINC01018介导E2F1-CDK6通路调控结肠癌发病的机制

作者：陈宏伟; 徐怡顺; 陈渡; 刘周静; 王薇; 张美连; 潘冰洁

来源：中国医师杂志, 2021, 23(12).

• 结肠肿瘤
• RNA, 长链非编码
• LINC01018
• 细胞增殖
• 细胞迁移

目的研究LINC01018参与结肠癌发病的具体机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠癌组织和细胞以及癌旁组织和细胞中LINC01018的表达差异情况。建立稳定过表达LINC01018的HT-29细胞株。利用RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测LINC01018与E2F1蛋白之间是否存在相互作用。利用双荧光素酶实验检测E2F1对CDK6启动子的调控作用。在过表达LINC01018的HT-29细胞中同时上调E2F1或CDK6表达, 再通过CCK-8实验、Transwell实验、Western blot方法检测HT-29细胞的增殖、侵袭、迁移以及细胞中CDK6及MMP-2蛋白表达情况。结果 LINC01018在结肠癌组织及细胞中异常低表达。RIP实验结果显示, LINC01018与E2F1蛋白存在相互作用。双荧光素酶实验结果表明, E2F1蛋白能够增强CDK6启动子工作效率, E2F1对CDK6存在正调控作用;而LINC01018的过表达能够减弱E2F1对CDK6的正调控作用。回复实验显示, 上调E2F1或CDK6表达能够减弱LINC01018过表达对HT-29细胞增殖、侵袭、迁移及CDK6、MMP-2蛋白表达的影响。结论 LINC01018在结肠癌组织及细胞中异常低表达。LINC01018可能通过E2F1/CDK6/MMP-2轴调控HT-29细胞增殖、侵袭及迁移, 并参与结肠癌的发病。

• 单位
  湖南省脑科医院; 湖南省第二人民医院