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摘要
目的:观察在淫羊藿的干预下激素性股骨头坏死的骨小梁面积比、空骨陷窝率、脂肪细胞平均直径的变化情况,以确定淫羊藿防治该病的相关机制。方法:将取出的股骨用温0.9%氯化钠溶液冲洗数次,在超净工作台内用钳子夹碎股骨两端,用10mL DMEM培养液冲洗骨髓腔多次,反复吹打,将团块细胞吹匀。过滤、离心之后加入含10%FBS的DMEM培养液以2×106/mL细胞密度接种于75cm2细胞培养瓶中,置于37℃,5%CO2,饱和湿度的CO2培养箱中培养,细胞80%汇合后传代。取第二代MSCs以每孔1×105个细胞接种于6孔培养板,定为实验的0d。在倒置显微镜下逐日观察MSCs形态及生长分化情况。实验第10天时,一部分细胞用反复冻融法进行裂解,离心取上清用ALP试剂盒测定细胞内ALP活性;实验第21天时,其余细胞油红"O"染色,光镜下观察脂肪细胞形态并计数。结果:模型组骨小梁面积比处较低水平,与试验组、空白组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组空缺骨陷窝率处较高水平,与试验组、空白组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组脂肪细胞平均直径处较高水平,与试验组、空白组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:激素可引起股骨头空骨陷窝比率升高、脂肪细胞直径增大及骨小梁面积比降低,淫羊藿可改善上述变化。
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单位河南中医学院第一附属医院; 郑州大学第一附属医院
