霍乱弧菌基质辅助激光解吸飞行时间质谱数据库的建立与应用

作者：刘莉; 韩笑; 王紫薇; 汪琦; 赵晓娟; 曾静^*

来源：食品安全质量检测学报, 2020, 11(14): 4773-4782.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2020.14.047

• 基质辅助激光解吸飞行时间质谱法
• 霍乱弧菌
• 鉴定

目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)快速检测霍乱弧菌,并建立数据库。方法考察培养基、培养时间、培养温度以及样品前处理方法对图谱质量和鉴定结果的影响,对方法的稳定性、重复性进行研究;采集101株霍乱弧菌食品分离株MALDI-TOF-MS指纹图谱,并对图谱进行分析。其中标准菌株CICC23794及40株分离株作为建库菌株,其余60株用于建库后的测试。结果采用2%NaCl-TSA培养基,在37℃、24h条件下培养,可达到强峰值信号,谱图重现性良好,甲酸-乙腈提取法获得的质谱图特征峰多,信噪比高;建库后, 60株霍乱弧菌均可达到高于2.0的水平,其中约有20株霍乱弧菌鉴定分值可达到2.4以上。结论本研究建立的霍乱弧菌MALDI-TOF-MS鉴定方法结果准确,可用于实际检测。