邻氨基苯甲酸抑制TRPM2通道对脑缺血再灌注损伤小鼠神经功能及小胶质细胞活化的影响

作者：仇莽莽; 焦岩; 王芳姣; 张燕; 郑乐怡; 马康; 梁雪云; 文玉军; 余建强; 何仲义; 牛建国^*

来源：宁夏医科大学学报, 2021, 43(06): 577-584.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2021.06.005

• TRPM2
• 脑缺血再灌注损伤
• 小胶质细胞
• 炎症因子

目的探究N-(对戊基肉桂酰基)邻氨基苯甲酸(ACA)抑制瞬时受体电位通道M2(TRPM2)对小鼠脑缺血再灌注损伤小鼠神经功能及小胶质细胞活化的影响。方法将48只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组(Sham)、大脑中动栓塞再灌注组(MCAO/R)和TRPM2通道抑制组(ACA)。采用线栓法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型,采用Bederson评分法筛选损伤程度一致的模型进行后续实验。ACA组小鼠缺血2 h后腹腔注射25 mg·kg-1ACA(TRPM2通道抑制剂)。再灌注24 h后,采用Bederson评分评价小鼠神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评价小鼠脑梗死率,激光散斑血流成像监测小鼠大脑皮质脑血流量,苏木精—伊红染色法(HE)染色观察各组小鼠缺血侧颞侧皮质区、海马CA1、CA3及缺血半暗带区形态学变化;Nissl染色观察各组小鼠缺血侧颞侧皮质区、海马CA1、CA3及缺血半暗带区神经元数量的变化;免疫荧光染色观察半暗带区离子钙结合衔接分子1(Iba-1)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果与Sham组相比,MCAO/R组小鼠Bederson评分、脑梗死率均上升(P均<0.05);与MCAO/R组相比,ACA组小鼠Bederson评分、脑梗死率降低,大脑皮质缺血侧脑血量增加(P均<0.05)。HE及Nissl染色结果发现:与Sham组相比,MCAO/R组在缺血侧颞侧皮质区、海马CA1、CA3及缺血半暗带区均可见组织结构紊乱,细胞核固缩,嗜酸性细胞及淋巴细胞多见,神经细胞数量明显减少;与MCAO/R组相比,ACA组缺血侧颞侧皮质区、海马CA1、CA3及缺血半暗带区组织结构明显改善,炎性细胞明显减少,神经元数目明显增加,Iba-1、i NOS荧光强度减少,TNF-α表达量减少(P均<0.05)。结论 ACA抑制TRPM2通道对脑缺血再灌注损伤小鼠具有保护作用,可能与ACA抑制小胶质细胞活化并减少炎性因子的分泌有关。

• 单位
  宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学; 基础医学院