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摘要
目的:以微流控芯片为检测平台,建立单细胞水平检测单核苷酸多态性的实验方法。方法:从健康成人静脉血中分离出单个淋巴细胞,采用不同的细胞裂解方法制备单细胞模板,应用巢式PCR方法扩增CYP2B6基因目标片段,限制性内切酶酶切产物,酶切后分别用常规的琼脂糖凝胶电泳技术和微流控芯片法进行检测。结果:酶裂法、碱裂法和冻融法制备单细胞DNA模板的扩增成功率分别为96%,85%和72%,单细胞PCR微流控芯片法基因分型结果与普通PCR琼脂糖凝胶电泳方法完全一致。结论:单细胞PCR微流控芯片法能够特异、准确地检测单个淋巴细胞的CYP2B6基因型,且样品消耗量低,操作简便,结果可靠。
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单位山东省职业卫生与职业病防治研究院; 山东省肿瘤医院
