摘要

目的构建大鼠线粒体蛋白ANT1基因的腺病毒载体,并检测其在体外培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达。方法将大鼠线粒体膜蛋白腺(嘌呤核)苷酸移位酶(adenine nucleotide translocase,ANT)1基因片段克隆至穿梭质粒pShuttle-GFP-CMV上,在细菌中将穿梭质粒和pAdXsi载体进行重组,经脂质体转染HEK293细胞对重组腺病毒包装、扩增,用其感染体外培养的VSMC。采用PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,荧光显微镜观察转染效率。用Western印迹检测转染后ANT1在VSMC中的表达。结果酶切鉴定及PCR结果表明ANT1基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度...

  • 单位
    新桥医院