miR-181a-5p靶向Kras对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的调控作用

作者：何建苗; 赵华洲; 王婷; 邱啸臣; 翁剑峰; 张心慧; 曹志宇

来源：解放军医学杂志, 2018, 43(09): 735-739.

• 微小RNAs
• Kras
• 乳腺肿瘤
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨miR-181a-5p靶向Kras对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的调控作用。方法选取乳腺癌细胞系MDA-MB-231和人乳腺细胞系HBL-100,分别采用RT-PCR、Western blotting检测miR-181a-5p及Kras蛋白的表达。选取MDA-MB-231细胞,分别转染miR-181a-5p mimics及阴性对照mimics,采用RT-PCR检测细胞中miR-181a-5p的表达,Western blotting检测Kras蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。分别将野生型Kras 3’-UTR质粒(Kras-wt)和突变型Kras 3’-UTR质粒(Kras-Mut)与miR-181a-5p mimic,或阴性对照mimics共转染至MDA-MB-231细胞,采用双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶的活性。结果与HBL-100细胞相比,MDAMB-231细胞中miR-181a-5p的表达明显降低(P<0.05),而Kras蛋白的表达明显升高(P<0.05)。与转染阴性对照mimics相比,转染miR-181a-5p mimic可使MDA-MB-231细胞中miR-181a-5p的表达明显上调(P<0.05),Kras蛋白的表达明显下调(P<0.05),并可使MDA-MB-231细胞增殖活性降低(P<0.05),凋亡细胞比例增加(P<0.05),G2/M期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05)。与转染阴性对照mimics和(或)Kras-Mut相比,共转染miR-181a-5p mimic及Kras-wt后MDA-MB-231细胞中的荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。结论在乳腺癌细胞MDA-MB-231中miR-181a-5p呈低表达,Kras呈高表达;过表达miR-181a-5p可通过靶向Kras抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。

• 单位
  首都医科大学附属北京朝阳医院; 解放军309医院