骺板软骨细胞的冻存及复苏

作者：尹飞; 郭丽; 武汉; 王金成; 高中礼; 刘美含; 段德生

来源：中国实验诊断学, 2005, 9(01): 129-130.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4287.2005.01.049

• 骺板软骨细胞
• 冻存
• 复苏

目的　研究骺板软骨细胞冻存的方法。方法　取对数生长期的骺板软骨细胞 ,加入配制好的冻存液 (冻存液A :培养液与DMSO ;冻存液B :含 5 %小牛血清的培养液与DMSO ;冻存液C :含 2 0 %小牛血清的培养液与DMSO ;冻存液D :小牛血清与DMSO混合 ;其中DMSO终浓度均为 10 %。) ,冻存。细胞复苏后用台盼蓝拒染试验检测细胞存活率。然后接种于培养皿中 ,采用苏木 伊红染色和甲苯胺蓝染色 ,观察细胞形态及合成糖胺多糖的能力。结果　细胞活率为 :A冻存液 70 % ,B冻存液 75 % ,C、D两种冻存液无明显差别 ,分别为 89%和 92 %。复苏的细胞贴壁时间延迟 ,但培养 72小时以后 ,细胞活力明显增强。甲苯胺蓝异染提示 ,经冷冻保存后软骨细胞仍能保持合成异染基质 (糖胺多糖 )的能力。结论　本实验冻存、复苏的方法结果稳定 ,可用于保存骺板软骨细胞。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院; 吉林大学; 公共卫生学院