摘要

目的探讨原花青素(PCs)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法取对数期H9c2心肌细胞随机分成5组:对照组、模型组、Nrf2抑制剂组和低、高剂量实验组。用噻唑蓝(MTT)法测定各组细胞活力,以比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量和细胞凋亡,用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白及核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平。结果对照组、模型组、低、高剂量实验组和Nrf2抑制剂组的细胞存活率分别为(100.00±2.00)%,(47.67±4.05)%,(64.39±5.11)%,(83.19±2.83)%,(58.23±4.72)%;细胞上清LDH水平分别为(156.82±6.30),(258.32±9.42),(215.97±10.67),(171.88±14.18),(247.84±7.71)U·L-1;SOD活性分别为(35.70±3.81),(17.32±2.12),(21.53±1.11),(32.11±2.51),(20.65±2.44)U·mL-1;MDA含量分别为(1.12±0.20),(3.45±0.41),(3.07±0.22),(1.49±0.30),(3.12±0.18)nmol·mL-1;ROS相对荧光强度分别为1.02±0.12,3.87±0.61,3.17±0.31,1.63±0.26,3.17±0.28;细胞内激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase-3)蛋白相对表达量分别为1.00±0.04,4.34±0.43,3.83±0.41,1.09±0.18,2.58±0.16;B淋巴瘤-2基因相关X(Bax)蛋白相对表达量分别为0.99±0.03,3.23±0.21,2.65±0.21,1.30±0.04,2.04±0.13;B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白相对表达量分别为1.00±0.03,0.30±0.04,0.62±0.07,3.45±0.17,0.33±0.02;Nrf2蛋白相对表达量分别为1.00±0.04,1.00±0.30,1.09±0.17,3.09±0.18,0.80±0.09;HO-1蛋白相对表达量分别为0.99±0.03,1.11±0.20,1.00±0.14,2.88±0.32,0.84±0.06。上述指标,高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);Nrf2抑制剂组与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 PCs可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞氧化损伤,发挥对心肌细胞损伤的保护作用。