摘要
恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)的转染有助于我们研究其基因的功能,例如抗药性。但转基因操作一直都非常具有挑战性,主要是由于疟原虫基因组的高A/T碱基序列结构(A+T含量约为82%)以及低转染效率。基于电穿孔的恶性疟原虫转染方法已成功应用于某些基因的研究中,而预载法的电穿孔是目前将外源DNA引入恶性疟原虫的首选方法。疟原虫基因的定点编辑多采用双质粒转染的方法,通常认为,对疟原虫的成功转染需要大量高纯度质粒DNA以及精确的转染体系。本文除对目前常用的电转方法进行了评价外,还介绍了一种新的转染方法,即裂解-再密封红细胞转染(Lyse-Reseal Erythrocytes for Transfection)。并对质粒DNA浓度、转染试剂的使用、转染参数的设置、新鲜红细胞的添加以及转染成功的标记等因素在提高疟原虫转染成功率和效率方面的作用等进行综述,为从事该领域研究的同仁提供参考。
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