摘要

目的 研究舒芬太尼通过miR-199a-3p调节线粒体自噬减轻心肌细胞缺血/再灌注损伤的机制。方法 以缺氧/复氧处理体外构建缺血/再灌注心肌细胞H9c2模型,实验分成对照组、模型组、实验组(0.4 ng·mL-1舒芬太尼)、实验+anti-miR-NC组(0.4 ng·mL-1舒芬太尼、inhibitor control)、实验+anti-miR-199a-3p组(0.4 ng·mL-1舒芬太尼、miR-199a-3p inhibitor)。以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测miR-199a-3p表达,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以蛋白质印迹法检测自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达,以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯法检测活性氧(ROS),以JC-1法检测线粒体膜电位。结果 对照组、模型组、实验组、实验+anti-miR-NC组、实验+anti-miR-199a-3p组心肌细胞中miR-199a-3p表达水平为1.00±0.09,0.56±0.05,0.92±0.06,0.90±0.07,0.42±0.02,细胞凋亡率分别为(8.36±0.72)%,(35.71±4.82)%,(15.84±1.67)%,(15.28±1.59)%,(25.48±2.19)%,Beclin1蛋白表达水平为0.25±0.04,0.47±0.05,0.31±0.02,0.29±0.05,0.39±0.04,LC3Ⅱ/Ⅰ水平分别为0.37±0.06,1.34±0.21,0.50±0.07,0.48±0.06,0.94±0.10,ROS水平分别为1 806.95±162.24,5 936.64±527.41,2 495.77±263.38,2 354.86±117.42,4 224.90±502.42,线粒体膜电位分别为1.03±0.09,0.49±0.06,0.86±0.09,0.87±0.07,0.69±0.04。上述指标,模型组与对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组比,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验+anti-miR-199a-3p组与实验+anti-miR-NC组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 舒芬太尼通过miR-199a-3p调节线粒体自噬减轻心肌细胞缺血/再灌注损伤。

  • 单位
    天津市第四医院; 天津医科大学总医院

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