盐酸戊乙奎醚诱导早期生长反应蛋白1的表达及其对人血管平滑肌细胞的增殖作用

作者：陈曦; 胡婷婷; 史惠卿; 刘小娟; 李楠

来源：中国药业, 2020, 29(11): 22-25.

• 早期生长反应蛋白1
• 细胞周期调控蛋白D1
• 血管平滑肌细胞
• 戊乙奎醚

目的探讨早期生长反应蛋白1(EGR1)在人血管平滑肌细胞(CRL-1999)增殖过程中的作用,以及影响下游基因和盐酸戊乙奎醚对其表达的影响。方法慢病毒转染敲低CRL-1999细胞中EGR1表达,构建siEGR1-CRL-1999细胞,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western Blot,WB)法实验验证其表达降低,同时观察下游基因细胞周期调控蛋白D1(CCND1)的表达变化。采用EDU法检测siEGR1-CRL-1999细胞的增殖能力。不同时间点观察用盐酸戊乙奎醚处理的CRL-1999细胞和siEGR1-CRL-1999细胞内EGR1蛋白的表达情况,并用WB法检测上述细胞不同时间点的磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2蛋白表达。结果成功构建siEGR1-CRL-1999细胞; siEGR1-CRL-1999细胞增殖能力较对照组降低,且CCND1的表达相应减弱;盐酸戊乙奎醚能诱导提高CRL-1999细胞的EGR1表达水平,1 h后开始提高,2 h时达峰值,并持续至8 h时; p-ERK1/2表达在处理1 h后达峰值,并维持至2 h时,而EGR1的蛋白表达变化在时间上总落后于p-ERK1/2。结论 EGR1通过CCND1影响CRL-1999细胞增殖,盐酸戊乙奎醚可能通过ERK1/2通路诱导EGR1表达。