鸡贫血病毒VP1、VP2和VP3基因酵母双杂交载体的构建及其自激活活性的鉴定

作者：孙芬芬; 高玉龙; 高宏雷; 祁小乐; 潘伟; 王笑梅

来源：中国兽医科学, 2010, (02): 111-115.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.02.001

• 鸡贫血病毒
• 蛋白相互作用
• 酵母双杂交载体
• 自激活作用 chicken anemia virus
• protein interaction
• yeast two-hybrid vector
• self-activation

为构建鸡贫血病毒(CAV)VP1、VP2、VP3基因酵母双杂交载体并鉴定其自激活作用,从CAV细胞传代毒M9905毒株中提取基因组DNA,利用PCR分别扩增VP1、VP2和VP3基因,采用Gateway技术将VP1、VP2和VP3基因分别克隆到酵母双杂交载体pDEST32和pDEST22中,构建了诱饵载体及猎物载体,经酶切和PCR鉴定且测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株Mav203,通过缺陷型平板SD/-Leu/-Trp/-His和SD/-Leu/-Trp/-Ura筛选以及LacZ报告基因检测载体有无自激活作用。结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST32-VP1/VP2/VP3和捕获载体pDE...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 黑龙江省农业科学院