蓝舌病病毒8型可视化RT-LAMP检测方法的建立

作者：李富祥; 赵文华; 杨仕标^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(10): 1027-1031.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0589.201902026

• 蓝舌病病毒8型
• 反转录环介等温扩增
• 快速检测

为建立蓝舌病病毒8型(BTV-8)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据BTV-8外衣壳蛋白(VP2)基因保守序列设计2对BTV-8血清型特异性引物,通过反应条件优化建立了BTV-8可视化RT-LAMP检测方法。该方法最佳反应条件为60℃1 h;利用本实验建立的方法检测BTV-8,以及其它23个血清型BTV以及口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、鹿流行性出血热病毒、阿卡斑病毒和狂犬病病毒,结果显示除BTV-8外,该方法与其它病原无交叉反应,特异性较强;该方法最低可检测到8.3×10-10 ng/μL的病毒RNA,敏感性是OIE标准套式RT-PCR检测方法的10倍,敏感性较高。应用建立的RT-LAMP方法和普通RT-PCR方法对38份牛羊临床样品进行检测,两种方法检测结果一致均为阴性。本研究建立的BTV-8可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、操作简便、快速和高通量检测的优点,为BTV-8的可视化快速检测提供可行方法。

• 单位
  云南省畜牧兽医科学院