神经干细胞联合神经营养因子-3基因修饰的嗅鞘细胞移植对创伤性脑损伤大鼠神经功能的影响及机制

作者：张召宇; 李梦欣; 李慧堂; 李海明; 金保哲^*

来源：新乡医学院学报, 2023, 40(06): 501-506.

• 神经生长因子
• 神经干细胞
• 嗅鞘细胞
• 创伤性脑损伤

目的 探讨神经干细胞(NSCs)与神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)联合移植对大鼠创伤性颅脑损伤(TBI)后神经功能的影响及机制。方法 将100只Sprague Dawley雄性大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、NSCs组、OECs组、联合治疗组，每组20只。模型组、NSCs组、OECs组、联合治疗组大鼠采用改良Feeney法构建TBI模型。造模1 d后，将不同的试剂注入各组大鼠损伤灶进行细胞移植，模型组大鼠注入10μL生理盐水，OECs组大鼠注入10μL NT-3基因修饰的OECs悬液，NSCs组大鼠注入10μL NSCs悬液，联合治疗组大鼠注入5μL NT-3基因修饰的OECs细胞悬液和5μL NSCs悬液，注射完成后继续常规饲养。分别于移植后1、7、14、28 d,各组随机取10只大鼠，采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评估各组大鼠的神经功能缺损程度。移植后7 d,采用酶联免疫吸附试验法检测大鼠脑组织中白细胞介素(IL)-6、IL-1β及神经生长因子(NGF)水平。移植后28 d,采用苏木精-伊红染色法观察大鼠脑组织病理学改变，采用免疫组织化学染色法检测大鼠脑组织中NGF表达。结果 移植后1、7、14、28 d,模型组、NSCs组、OECs组、联合治疗组大鼠mNSS评分显著高于假手术组(P<0.05);移植后7、14 d, NSCs组、OECs组、联合治疗组大鼠mNSS评分显著低于模型组(P<0.05);移植后7、14 d, NSCs组、OECs组、联合治疗组大鼠mNSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);移植后28 d, NSCs组、OECs组、联合治疗组大鼠mNSS评分显著低于模型组，联合治疗组大鼠mNSS评分显著低于NSCs组和OECs组(P<0.05);移植后28 d, NSCs组与OECs组大鼠mNSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。移植后28 d,假手术组大鼠脑组织结构完整，核仁明显，细胞排列有序；模型组大鼠损伤灶周围脑组织形态不规则，细胞肿胀，排列紊乱，可见坏死细胞及细胞核固缩，存在炎症细胞浸润；相较于模型组，NSCs组及OECs组大鼠脑组织细胞肿胀，排列紊乱，细胞核固缩、炎症浸润现象稍有改善；相较于模型组、NSCs组及OECs组，联合治疗组大鼠脑组织细胞排列相对规整，细胞肿胀减轻，核仁清晰。模型组大鼠脑组织中IL-6、IL-1β表达水平显著高于假手术组(P<0.05),联合治疗组大鼠IL-6、IL-1β表达水平显著低于模型组、NSCs组、OECs组(P<0.05),NSCs组、OECs组大鼠脑组织中IL-6、IL-1β水平显著低于模型组(P<0.05)。NSCs组、OECs组、联合治疗组大鼠脑组织中NGF阳性表达细胞数及NGF水平显著高于假手术组、模型组(P<0.05);假手术组与模型组大鼠脑组织中NGF阳性表达细胞数和NGF水平比较差异无统计学意义(P>0.05);联合治疗组大鼠脑组织中NGF阳性表达细胞数及NGF水平显著高于NSCs组、OECs组(P<0.05);NSCs组与OECs组大鼠脑组织中NGF阳性表达细胞数及NGF水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NSCs和NT-3基因修饰的OECs联合移植治疗可显著减轻TBI大鼠神经功能缺损程度，提高NGF表达水平，减轻炎症反应，从而起到神经保护作用。

• 单位
  新乡医学院第一附属医院