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摘要
目的探讨微小RNA-24(miR-24)对氧化应激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和管腔形成的影响及其机制。方法将HUVECs分为5组:空白组、H2O2组、miR-24组、anti-miR-24组和miR-NC组。空白组细胞不做任何处理,H2O2组用500μmol·L-1 H2O2处理12 h,miR-24组、anti-miR-24组和miR-NC组分别转染miR-24高表达、anti-miR-24及对照慢病毒质粒后,再用500μmol·L-1 H2O2处理12 h。以二氢乙啶荧光探针法检测活性氧(ROS)水平,人工基底膜检测HUVECs管腔形成能力,蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)/磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)表达水平。结果空白组、H2O2组、miR-NC、miR-24组和anti-miR-24组的细胞ROS含量分别为(100.00±0.00)%,(208.00±4.58)%,(203.03±5.57)%,(271.67±4.50)%和(138.03±2.65)%;这5组的管腔节点数分别为677.01±52.84,304.55±23.40,311.22±38.17,242.44±12.79和439.11±25.68;这5组的蛋白表达量(p-Akt/Akt)分别为0.72±0.03,0.41±0.01,0.41±0.03,0.27±0.06和0.56±0.02;这5组的p-eNOS/eNOS表达量分别为0.61±0.02,0.38±0.03,0.37±0.01,0.27±0.03和0.47±0.03。上述指标:H2O2组与空白组比,差异均有统计学意义(均P<0.05);miR-NC、miR-24组和anti-miR-24组与H2O2组比, miR-24组和anti-miR-24组的差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在氧化应激条件下,miR-24可增加ROS水平,降低NO生物利用度,进而抑制HUVECs增殖迁移和管腔形成,这可能与miR-24抑制Akt/eNOS蛋白的磷酸化水平有关。
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