DJ-1保护多巴胺能神经元抵抗过氧化氢氧化应激损伤的研究

作者：胡霞; 陈方方; 孔陈苏^*

来源：安徽医药, 2018, 22(12): 2323-2500.

• DJ-1
• 过氧化氢
• 帕金森病
• 氧化损伤

目的探讨DJ-1保护多巴胺能神经元免受过氧化氢(H2O2)损伤的机制。方法使用神经生长因子(NGF)将大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)诱导为多巴胺能神经元模型。H2O2处理引起细胞氧化应激损伤模型,CCK-8试剂盒检测细胞活性,DHE染色检测细胞内ROS水平。PI/Hoechst染色检测细胞凋亡,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测DJ-1和TH蛋白的表达。构建DJ-1过表达载体,检测DJ-1对H2O2中PC12细胞的保护作用及对细胞内活性氧(ROS)的影响。RT-qPCR检测α-synuclein,p53,Bax,Bcl-2的表达变化。结果 H2O2处理可显着降低PC12细胞的活性,H2O2处理24 h以上可引起细胞凋亡。H2O2处理下调DJ-1蛋白和TH蛋白的表达,并且在RNA水平上α-突触核蛋白的表达增加。另外p53,Bax和caspase-3表达增加,Bcl-2表达减少。DJ-1的过表达可以抑制H2O2引起的ROS增加,DJ-1可以维持细胞活性,减少H2O2的凋亡。在RNA水平抑制α-突触核蛋白,p53,bax,bcl-2的凋亡和抗凋亡基因表达变化。结论 DJ-1能够抑制H2O2引起的ROS水平升高,减少α-synuclein积累,抑制p53,凋亡基因如bax的表达减弱了多巴胺能神经元中H2O2诱导的氧化应激损伤。

• 单位
  鄯善县人民医院; 神经内科; 四川省八一康复中心