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摘要
本发明公开一种在小鼠胚胎细胞中基因定点突变的构建方法,通过在小鼠胚胎细胞中引入特定核算序列构建基因定点突变小鼠,包括以下步骤：在小鼠目标基因组序列中确定目标靶序列；按所述目标靶序列的顺序,构建能够识别并切割目标基因的TALEN核酸序列；将所述TALEN核酸序列导入小鼠胚胎细胞内；所获得的小鼠胚胎细胞用于体外培养或直接植入母鼠,表达TALEN并切割目标基因组,从而筛选目标基因突变的小鼠。本发明具有无需构建同源重组打靶载体、无需进行ES打靶细胞筛选,突变体比例高,操作简便,实验成本和周期大大减少等优点。
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