摘要
目的研究miR-30a-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)增殖和迁移的影响,并探讨其调控机制。方法NSCLC A549细胞系分成两组,miR-30a-5p组和对照组,分别转染miR-30a-5p mimics和microRNA scramble,MTT实验及细胞划痕实验分别测定两组细胞增殖和迁移能力,实时聚合酶链反应(real time-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别测定两组泛素蛋白连接酶(UBE3C)mRNA和蛋白质表达水平。结果培养48 h后,miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组[(203.7±16.8)%vs(330.4±20.7)%(P=0.000)];培养72 h后,miR-30a-5p组相对活细胞百分比(258±30.2)%,对照组相对活细胞百分比(403.4±28.4)%,miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组(P=0.001)。细胞划痕实验示:miR-30a-5p组划痕愈合率为(23.2±2.7)%,对照组划痕愈合率为(89.2±4.8)%,miR-30a-5p组划痕愈合率低于对照组(P=0.000)。real time-PCR显示,miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平为(0.15±0.02),对照组UBE3C mRNA表达水平为(1.03±0.09),miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平低于对照组(P=0.000);Western blot显示,miR-30a-5p组UBE3C蛋白表达水平为(1.57±0.26),对照组UBE3C蛋白表达水平为(5.32±0.42),miR-30a-5p组UBE3C蛋白表达水平低于对照组(P=0.000)。结论 miR-30a-5p抑制NSCLC增殖和迁移,其机制与下调UBE3C表达有关。
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单位华中科技大学; 同济医学院附属武汉中心医院; 武汉市第一医院