丁酸钠协同成纤维细胞生长因子2体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究

作者：赵亚如; 刘洋; 吕洋; 王文华; 王浩宇; 王巧敏; 王海萍^*

来源：中国医药导报, 2021, 18(27): 21-197.

• 丁酸钠
• 成纤维细胞生长因子2
• 骨髓间充质干细胞
• 心肌细胞

目的探讨丁酸钠协同成纤维细胞生长因子2(FGF-2)体外诱导骨髓间充质干细胞(BMMSC)向心肌细胞分化的可行性。方法经全骨髓贴壁法分离纯化BMMSC,进行流式细胞技术鉴定;分别加入普通完全培养基(对照组)、1 mmol/L丁酸钠培养基(丁酸钠组)、1 ng/ml FGF-2的培养基(FGF-2组)、1 mmol/L丁酸钠和1 ng/ml FGF-2的培养基(联合组)诱导培养。提取四组细胞加药诱导后1、2、4周的总RNA,通过定量反转录PCR(qRTPCR)检测心肌特异性转录因子。运用免疫组织化学和Western blot技术,检测BMMSC诱导4周后心肌特异性蛋白的表达。结果原代细胞培养48 h后呈圆扁形、贴壁生长,有些细胞形态已出现短梭形改变;培养1周的BMMSC进一步伸展,出现梭形、多角形和不规则形等多种形态;诱导培养4周后的BMMSC,相邻细胞间具有明显的方向性排列,一些细胞甚至成了漩涡样结构。流式细胞仪结果证明分离的细胞为纯化的BMMSC。qRT-PCR检测结果:心肌特异性基因GATA-4在诱导2周表达最强,联合组明显高于其他各组(P <0.05)。Western blot和免疫细胞化学检测结果:BMMSC经培养4周后的心脏特异性蛋白联合组高于其他各组(P <0.05)。结论丁酸钠和FGF-2诱导BMMSC向心肌样细胞的分化,联合诱导比单独诱导效果好。

• 单位
  河北北方学院