稳定高表达MT-1E基因人肾小管上皮HK-2细胞株的构建

作者:李莎; 罗磊; 黄邵玲; 李继猛; 熊艳艳; 朱雪芹; 谢颖*
来源:广东医学, 2022, 43(04): 416-421.
DOI:10.13820/j.cnki.gdyx.20213115

摘要

目的 成功构建高表达金属硫蛋白MT-1E基因的人肾小管上皮HK-2细胞株。方法 利用转染技术将测序鉴定后的质粒转染至HK-2细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的HK-2细胞,荧光显微镜观察并记录,通过western blot技术对阴性对照细胞组和高表达MT-1E组进行MT-1E蛋白表达量鉴定。结果 转染后的质粒测序结果包含MT-1E基因序列,嘌呤霉素筛选最小致死浓度为4μg/mL,高表达MT-1E组蛋白相对表达量为2.79±0.16,与阴性对照细胞组比较,差异有统计学意义(t=15.89,P=0.016)。结论 本研究完成高表达MT-1E基因的HK-2细胞株构建,可用于后续相关分子生物学实验。

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