复苏促进因子结合蛋白A的原核表达及对耻垢分枝杆菌的促生长作用

作者：师长宏; 赵勇; 毛峰峰; 张海; 白冰; 江鹰

来源：中国比较医学杂志, 2010, (10): 66-67.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2010.11.001

• 复苏促进因子
• 结核分枝杆菌
• 表达
• 休眠

目的在大肠埃希氏菌中表达结核分枝杆菌复苏促进因子结合蛋白A蛋白(RipA),纯化后观察该蛋白对耻垢分枝杆菌的促生长作用。方法采用PCR方法 ,从结核分枝杆菌H37Rv的DNA中扩增出编码RipA蛋白的Rv1477基因,测序正确后克隆入原核表达载体pProEx HTa,构建重组表达质粒pProEx HTa-RipA。以重组质粒转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性重组菌株,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导RipA表达,在变性条件下对目的蛋白进行亲和层析纯化。将纯化的RipA蛋白加入到耻垢分枝杆菌中,观察RipA蛋白的促生长作用。结果成功扩增了Rv1477基因,并克隆于表达载体pProEx HTa中,经酶...

• 单位
  第四军医大学