大肠癌细胞中COX-2调控E-cadherin机制研究

作者：汤建军; 林晶晶; 韩小乐; 李恒平^*

来源：临床和实验医学杂志, 2020, 19(12): 1295-1300.

• 大肠癌
• COX-2
• E-cadherin
• 塞来昔布

目的研究环氧化酶-2(COX-2)在大肠癌中的表达及其影响大肠癌增殖和凋亡的可能机制。方法选取对数生长期的大肠癌HT-29细胞,分别设置:空白对照组(未经处理HT-29细胞),塞来昔布120μmol/L组(直接在HT-29细胞内加入120μmol/L塞来昔布),阴性对照组(在加入120μmol/L塞来昔布组内进一步加入E-cadherin siRNA阴性对照物),塞来昔布120μmol/L+E-cadherin siRNA组(在加入120μmol/L塞来昔布组内进一步加入Ecadherin siRNA)。荧光染色液检测塞来昔布对HT-29细胞凋亡的影响; qRT-PCR和Western Blot检测大肠癌细胞中COX-2和E-cadherin的表达情况,加入塞来昔布抑制COX-2的表达后,观察E-cadherin表达的变化情况;加入塞来昔布抑制COX-2的表达,培养0 h、24 h、48 h后,MTT和流式细胞仪检测对细胞增殖和凋亡的影响;进一步加入Ecadherin siRNA抑制E-cadherin的表达后,MTT和流式细胞仪检测对细胞增殖和凋亡的变化;细胞培养0 h、48 h后细胞划痕实验检测不同处理后细胞迁移改变情况。结果塞来昔布诱导HT-29细胞凋亡在0～120μmol/L浓度范围内呈浓度和时间依赖性;在空白对照组的大肠癌细胞中,COX-2表达显著升高,E-cadherin表达异常降低;与空白对照组比较,加入塞来昔布降低COX-2的表达后,细胞内E-cadherin表达显著升高,蛋白与qRT-PCR结果一致,差异有统计学意义(P <0. 05);处理24 h、48 h后,与空白对照组比较,塞来昔布组中抑制COX-2的表达后,细胞增殖显著下降,凋亡增加,差异有统计学意义(P <0. 05);与阴性对照组比较,进一步加入E-cadherin siRNA抑制E-cadherin的表达后,细胞增殖增加,凋亡显著下降,差异有统计学意义(P <0. 05)。细胞处理48 h后,与空白对照组比较,塞来昔布组中抑制COX-2的表达后,细胞迁移能力显著下降,差异有统计学意义(P <0. 05);与阴性对照组比较,进一步加入Ecadherin siRNA抑制E-cadherin的表达后,细胞迁移能力增加,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论在大肠癌HT-29细胞内,COX-2异常高表达,异常高表达的COX-2通过抑制E-cadherin的表达,调控HT-29细胞的增殖、凋亡和迁移能力。

• 单位
  湖北省中医院; 襄阳市中医医院; 襄阳市第一人民医院; 湖北医药学院