摘要
目的构建一种具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,考察其对循环肿瘤细胞的筛选能力。方法利用细胞指数富集的配基系统进化(Cell-SELEX)技术对人骨肉瘤细胞MG63核酸适配体进行筛选和合成,利用化学气相沉积法(CVD),在硅片上以Au为催化剂制备GaN纳米线形成GaN纳米结构基片,利用软刻蚀方法制备聚二甲基硅氧烷(PDMS)混沌混合芯片作为盖片,并通过生物素-亲和素将核酸适配体与基片、盖片相结合来制备具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,通过原子力显微镜对基片形貌进行表征,并考察微流控芯片对循环肿瘤细胞的捕获能力及对细胞活力的影响。结果成功构建了一种具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,其平均高度、平均直径、粗糙度及表面积较原始硅片显著升高,纳米线的平均直径达到377.2 nm,对人骨肉瘤细胞MG63的捕获率为(95.34±5.4)%,对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的捕获率为(4.2±1.1)%,核酸外切酶作用20 min后,芯片上的循环肿瘤细胞的释放率为92.16%,培养20 h后细胞活力与对照组细胞无显著性差异(P>0.05)。结论成功制备具有骨肉瘤细胞靶向性的GaN微流控芯片,其在捕获能力、捕获特异性及生物安全性上具有良好效果,具有较好的应用前景。
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单位福州市第二医院